無細胞百日咳攻擊菌的製備及液氮保存方法分析_raybey雷竞技官网杜瓦瓶
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無細胞百日咳攻擊菌的製備及液氮保存方法分析

時間:2019-05-09 10:29來源: 作者:raybey雷竞技官网 點擊: 次
【摘 要】為了製備無細胞百日咳效價測定用攻擊菌並用液氮進行保存，對此方法進行評價。采用原代攻擊菌複蘇傳代後測定細菌濃度，並用蛋白腖水稀釋為27億個菌/ml，分裝凍存管中。放入液氮罐內，並對液氮保存的攻擊菌進行相應的檢測，用統計軟件計算。結果顯示，此方法製備的攻擊菌與傳統的攻擊菌無顯著性差異，凍後雖攻擊菌的毒力有所下降，但都在100～1000/MLD的正常範圍內，且凍後0、3、6、9、12月無顯著性差異。同批支間差異小，CV<5% 。通過此方法製備的攻擊菌穩定性好，試驗結果符合《中華人民共和國藥典》要求，可用於無細胞百日咳的效價測定。

【關鍵詞】無細胞百日咳攻擊菌；液氮保存；方法分析 

作為無細胞百日咳效價測定攻擊用的菌種，長期以來都是每次試驗前現開菌種的方式，這樣既麻煩，又浪費菌種，還有可能造成批間的效力試驗差異很大。甚至可能因攻擊菌不成立，導致試驗失敗。這樣浪費動物、人力、時間。

為此，實驗用事先製備攻擊菌低溫保存的方法來解決這些問題。製備及保存微生物具有容易變異的特性，因此在保藏過程中，必須使微生物的代謝處於最不活躍或相對靜止的狀態，才能在一定的時間內使其不發生變異而又保持生活能力，Mery-man（1956）曾引證在-130℃將無生化活性發生。據此可采用液氮保存攻擊菌。