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氣相液氮運輸罐短期儲存胚胎的可行性研究

時間:2019-05-20 09:33來源: 作者:raybey雷竞技官网 點擊:
氣相液氮運輸罐短期儲存胚胎的可行性研究  自增壓液氮罐

【摘  要】目的探討用氣相液氮運輸罐運輸小鼠胚胎和短時間保存小鼠胚胎的可行性。

【方  法】實驗使用4個小鼠品係(c57Bu6、B6D2、DBA/2、B10A),通過體外授精的方法得到2.細胞胚胎,用玻璃化冷凍法冷凍胚胎並儲存於液相液氮罐,然後轉移至氣相液氮運輸罐內放置14 d再轉入液相液氮罐,最後進行複蘇移植。

【結  果】4個品係的冷凍胚胎的複蘇率分別為69.7%、77.27%、77.59%、72.64%,對照組的相應複蘇率為97%、84.38%、75%、71.43%,差異均不明顯(p<0.05).
4個品係胚胎移植後,除B10A這個品係的出生率差異顯著外(屍<O.01),其他3個品係的差異均不顯著C屍>0.05)。

【結  論】在氣相液氮運輸罐短時間內儲存胚胎或通過氣相液氮運輸罐進行胚胎運輸是可行的。

【關鍵詞】小鼠胚胎;氣相液氮運輸罐;低溫保存

哺乳動物的胚胎超低溫保存最早在小鼠獲得成功,1972年英國學者Whittingham首先成功地冷
凍保存了小鼠胚胎,發明了胚胎的慢速冷凍保存方、法【1】。1985年RaU等【z】成功保存小鼠8細胞胚胎。

此後,研究人員主要從事低毒性的玻璃化溶液、簡化冷凍程序和除去毒性抗凍劑等方麵對玻璃化冷凍法加以改進【}s1。傳統的長期活體保種,不但需要大量空間、人力、物力,還可能發生遺傳漂變和遺傳汙染【61。許多實驗室都通過冷凍保存小鼠胚胎的方法建立冷凍胚胎庫,因此引進新的小鼠品係越來越多地通過引進小鼠胚胎的形式進行。

但傳統的液相液氮罐在運輸時有不少缺點,罐體體積大、分量重,溢出液氮容易凍傷人等。而新型的氣相液氮運輸罐是靠罐壁內層的液氮層吸附大量液氮,並向外排出液氮蒸汽來使罐內溫度達到一188℃至一194℃保存胚胎。它有著體積小分量輕的優點,方便運輸,還可以降低胚胎之間交義汙染。

本文通過小鼠冷凍2一細胞胚胎在氣相液氮運輸罐保存14 d後,進行複蘇和移植,並和保存在傳統液相液氮罐胚胎的複蘇率和出生率相比較,來探討用氣相液氮運輸罐運輸或短期保存小鼠胚胎的可行性。自增壓液氮罐

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