睾丸精子冷凍複蘇對icsi助孕過程_raybey雷竞技官网杜瓦瓶
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睾丸精子冷凍複蘇對icsi助孕過程

時間:2020-05-19 09:08來源: 作者:raybey雷竞技官网 點擊: 次
1.研究對象及分組：選取2010年1月至2014年9月在生殖中心因男方梗阻性無精子症行icsi助孕者，共214個周期，其中采用冷凍複蘇睾丸精子行icsi助孕107個周期（凍精複蘇組），采用新鮮睾丸精子行icsi助孕107個周期（新鮮精子組）。納入標準：第1周期行icsi治療、長方案超排卵、夫婦雙方染色體核型分析均正常者。排除標準：女方子宮內膜異位症、子宮肌瘤、子宮畸形、卵巢功能衰竭等。梗阻性無精子症確診依據：至少3次射出精液離心沉澱後未見精子，診斷性睾丸活檢可見成熟精子。液氮容器

2.睾丸穿刺取精：常規消毒鋪巾，利多卡因局部麻醉，用帶側孔的睾丸穿刺針經皮睾丸穿刺，稍拔出針芯，擠壓睾丸，再插入針芯，然後連穿刺針一起拔出，從穿刺針側孔挑出睾丸組織，置於含10%人血清白蛋白的人輸卵管培養液中，用2隻1ml注射器針頭劃破曲細精管，倒置顯微鏡下觀察，吹打混勻後直接離心處理。

3.精子冷凍：精子冷凍保護劑置室溫平衡30min；將經處理後含有精子的懸液與精子冷凍保護劑以1：1比例混勻，移入精子保存管進行分裝，室溫平衡10min；懸吊於液氮罐內距液氮麵5cm，10min後將精子保存管放入液氮長期保存。

4.精子複蘇：從液氮中取出保存精液的冷凍管，在室溫中放置30min；加入等量含10%sss的HtF培養液，混勻後進行洗滌離心；最後在沉澱物中加入含10%sss的HtF培養液混勻待用。

5.卵母細胞獲取、icsi及胚胎移植：超促排卵均采用黃體中期啟動的長方案，當直徑≥20mm的卵泡≥2個時，注射HcG10000U，36H後行陰道B超引導下穿刺取卵術。取卵後4～6H選取成熟卵母細胞（mii期）行icsi操作。取卵後第3天選擇最優的1～3枚胚胎移植。液氮容器

6.判斷指標：正常受精：icsi後16～17H觀察受精情況，以雙原核為正常受精；卵裂率：icsi後40～41H觀察卵裂情況，並計算卵裂球比例；優質胚胎：以卵裂球大小均勻，細胞飽滿，碎片<5%的i級胚胎和碎片≤20%的Ⅱ級胚胎為優質胚胎；可利用胚胎：所有移植及冷凍的胚胎；臨床妊娠：移植後14D查血β－HcG，確定是否生化妊娠，若為陽性，2周後B超檢查提示宮腔內或宮外見孕囊及胎心搏動者為臨床妊娠。

7.統計學分析：采用sPss13.0軟件進行數據分析，結果以均數±標準差（珚ｘ±s）表示，組間比較采用t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。