微型藻類液氮超低溫保存研究_raybey雷竞技官网杜瓦瓶
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微型藻類液氮超低溫保存研究

時間:2017-09-11 09:04來源: 作者:raybey雷竞技官网 點擊: 次

　　微型藻類是一類能進行光合作用的真核低等生物。種類繁多，形態各異。由於(yu) 微藻類具有多種價(jia) 值待於(yu) 開發，如微藻細胞和細胞高價(jia) 值代謝產(chan) 物的利用，因此需要建立穩定的超低溫保存體(ti) 係以保證其生物多樣性的可持續利用。

　　不同微藻在傳(chuan) 統的兩(liang) 步控溫冷凍法下的保存效果有顯著差異。隨著冷卻速度的增大，解凍速度對微藻細胞存活率的影響越來越大。以體(ti) 積分數15%二甲基亞(ya) 碸為(wei) 保護劑，當冷卻溫度高於(yu) 0.5℃/min時，多數微藻在快速解凍條件下的存活率遠高於(yu) 慢速解凍。Santiago-Vdzquez[州首次以體(ti) 積分數10%乙醇和20%甲醇作為(wei) 保護劑，分別采用低速冷凍法。(1℃/min)、三步冷凍法(一20℃放置2 h，一70℃放置2 h，投入液氮罐中)、兩(liang) 步冷凍法(一70℃放置2 h，投入液氮)、一步冷凍法(直接投入液氮)對共生甲藻進行了超低溫保存，其中兩(liang) 步冷凍法的保存效果最佳，19周後甲藻細胞仍保持很高活性。Harding[51采用玻璃化和藻酸鹽包埋脫水法替代兩(liang) 步控溫冷凍法對部分微藻成功進行了保存並利用差示掃描量熱法和氧脅迫生物化學標記研究了不同保護劑中水的狀態變化(冰核形成、融化、玻璃化)和不同方法中造成細胞損傷(shang) 的關(guan) 鍵因素。

　　此外，細胞密度對藻類超低溫保存也有重要的影響，但是經常被人們(men) 忽視，最新研究發現衣藻在高細胞密度下的凍融存活率很低。高密度哺乳動物紅細胞凍融損傷(shang) 是由細胞間的相互作用造成的，而造成衣藻死亡的原因是冷凍和解凍時細胞壁釋放的一種有害物質，這種物質在正常培養(yang) 條件下對細胞無毒害作用而在低溫條件下可降低細胞的活性。目前還有大量藻類不能利用超低溫保存法進行保存，造成保存失敗的因素還有待研究。