液氮凍存細胞種在-80℃低溫冷凍保藏_raybey雷竞技官网杜瓦瓶
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液氮凍存細胞種在-80℃低溫冷凍保藏

時間:2023-09-13 14:21來源:班德公司 作者:小編 點擊: 次

　　將菌種保存在-80℃冰箱中，以緩解細胞生理活動的冷凍。液氮罐製造商分享如下操作步驟：

　　先做好安瓿管的準備

　　安瓿管材料應為(wei) 中性玻璃。清洗安瓿管時，用2%硫酸浸泡一夜。自來水衝(chong) 洗幹淨後，用蒸餾水浸泡至pH中性。幹燥後，貼上標簽，標明菌號和時間。加入脫脂棉塞後，在121℃下進行高壓滅菌(15℃)～20)min，備用。

　　如何利用液氮將菌種冷凍在-80℃

　　其次，要做好保護劑的選擇準備

　　保護劑的類型應根據微生物的類型進行選擇。製備保護劑時，應注意其濃度和pH值，以及滅菌方法。如血清，可過濾滅菌;牛奶應先脫油，用離心法去除上油，一般在100℃間歇煮2～3次，每次(10～30)min，備用。自增壓液氮罐

　　今後，要注意微生物保存物的準備

　　在*適當的培養(yang) 條件下，將細胞培養(yang) 到靜止期或成熟期，經過純度檢查，與(yu) 保護劑攪拌均勻，分裝。微生物培養(yang) 物濃度應低於(yu) 細胞或細胞(108-1010)個(ge) /ml(大腸杆菌)(Escherichiacoli)例如，為(wei) 了獲得每毫升1010個(ge) 活細胞菌液2ml～2.5mL，隻有兩(liang) 個(ge) 10ml瓊脂斜坡)。

　　選擇較長的毛細滴管，直接滴入安瓿管底部，切記不要濺到上管壁上，每管裝配量約(0.1～0.2)mL，如果是球形安瓿管，則裝載量為(wei) 半個(ge) 球。如果是液體(ti) 培養(yang) 的微生物，應離心去除培養(yang) 液，然後將培養(yang) 物與(yu) 保護劑混合，然後放入安瓿管中。安瓿管的分裝時間應盡可能短，*幸運的是(1)～2)ml內(nei) 分裝並預凍。分裝時應注意在無菌環境中操作。自增壓液氮罐

　　然後進行凍結保存

　　將安瓿管或塑料冷凍管儲(chu) 存在-80℃的環境中。

　　我們(men) 還必須知道，如果我們(men) 想在冷藏後取出複蘇方法。從(cong) 冰箱中取出安瓿管或塑料冷凍管，應立即放置38℃～40℃水浴迅速恢複，適當快速搖晃。直到內(nei) 部凍結完全溶解，約需50s～100s。打開安瓿管或塑料冷凍儲(chu) 存管，將內(nei) 容物移至適當的培養(yang) 液中進行培養(yang) 。