生物樣本庫儲存腦脊液用於神經係統疾病生物標誌物分析的研究

　　腦脊液能夠反映神經係統疾病的病理生理變化，對於(yu) 神經保護措施以及生物標記物的研究非常必要。因此，腦脊液生物樣本庫與(yu) 神經係統疾病的發現生物標記物及疾病評估密切相關(guan) 。生物樣本庫保存腦脊液的一個(ge) 重要方麵是質控，這對於(yu) 持續的患者隨訪以及各研究中心之間樣本交換十分必要。通過係統性地研究以闡明不同前處理和儲(chu) 存對於(yu) 腦脊液中大量蛋白的影響是首要和必要的。

　　加強國際網絡合作以及嚴(yan) 格使用標準化操作流程是腦脊液樣本庫的重要特點。在本文中提到的也是當前采用的腦脊液及血液樣本的采集和儲(chu) 存標準流程使得大規模在病例及對照中研究生物標記物成為(wei) 可能。總之，多個(ge) 中心間的合作和努力使得神經疾病的生物標記物研究已邁入新時代。生物樣本庫www.zhixinkejidasha.com的標準化流程包括樣本收集、質量控製以及合理選取生物標記物研究中的對照組，極大地提高了生物標記物研究的質量。

　　在各種急性和慢性神經係統疾病中，腦脊液能夠反映大腦特殊的病理生理學過程，檢測和量化其中的多種分子對疾病的診療起著重要作用，有報道表明，對腦脊液中澱粉樣β蛋白、微管相關(guan) 總tau蛋白及磷酸化的tau蛋白的檢測能夠區分阿爾茲(zi) 海默病和非阿爾茲(zi) 海默病的老年癡呆。本文主要討論了腦脊液保存的特點，包括完善患者電子病曆及與(yu) 數據庫的連接、二維碼標簽應用的重要性、實施自動化檢索以及前處理因素對腦脊液的影響。

　　本文總結了以下幾點可能對的腦脊液前處理產(chan) 生影響的因素：

　　1.與(yu) 患者相關(guan) 因素。

　　包括患者在樣本采集當日禁食、吸煙、飲酒、咖啡因攝入量和鍛煉等因素，這些因素可能影響腦脊液中生物標誌物的含量;

　　2.實驗室處理因素。

　　腦脊液和配對血液收集指南

　　標號

　　處理過程

　　腦脊液

　　血液

　　A收集步驟

　　1、收集和儲(chu) 存時間;記錄收集的時間和日期;同左

　　2、建議采集量：至少12ml，第1-2ml用於(yu) 常規CSF檢測。後10ml用於(yu) 儲(chu) 存，10ml EDTA處理的血漿;10ml血清

　　3、穿刺部位：L3-L5椎間隙，血管

　　4、血液汙染：放棄被血細胞汙染的CSF

　　血液細胞汙染的標準為(wei) ：500個(ge) /ul。記錄用於(yu) 診斷樣本中的血細胞數量;無

　　5、穿刺針型號：無創傷(shang) ，標準型號：21-23G

　　6、采集管型號：型號為(wei) 大於(yu) 10ml的旋蓋聚乙烯胺采集管，血清：無凝血激活劑或凝膠，EDTA血漿：無蛋白酶抑製劑

　　7、其他應同時收集的體(ti) 液標本：血清;無

　　8、其他應同時收集的體(ti) 液標本：血漿：EDTA(優(you) 於(yu) 檸檬酸)處理;無;B保存前處理

　　9、凍存前保藏溫度;離心及離心前、後均置於(yu) 室溫中;同左

　　10、離心：2000g(1800-2000)，10min，室溫離心;同左

　　11、修正案草案修改了人口與(yu) 計：30-60min，最長不超過2h。離心後樣本應該立即分裝凍存，間隔時間不超過2h;30-60min，最長不超過2h;用於(yu) 蛋白組學研究的樣品離心後1h內(nei) 處理。血清凝血最少需要30min。

　　12、分裝管型號：修正案草案修改了與(yu) 全靈2ml分裝用於(yu) 常規檢測，1ml分裝於(yu) 樣本庫)並記錄廠家;同左

　　13、分裝份數：最少分裝2管。建議的研究用量為(wei) 10ml，因此分裝份數大於(yu) 10份

　　最少

　　14、每管分裝量：每份最少量為(wei) 0.1ml，具體(ti) 參照分裝管型號(0.2ml、0，5ml、1ml)，管內(nei) 儲(chu) 存量為(wei) 總體(ti) 積75%;同左

　　15、編碼：修正法草案規定，具備相應專(zhuan) 業(ye) 技術人員、設施設備、倫(lun) 理審查機構以及管理製度的醫療;同左

　　16、凍存溫度：-80℃;同左

　　目前，ISBER及生物樣本庫科學工作小組對當前生物樣本庫質控進行總結。研究發現前處理差異可能影響血液中某些酶活性，但這些研究都需要反複論證和實驗。由於(yu) 腦脊液中蛋白豐(feng) 度較低甚至低於(yu) 常規檢測方法的檢測閾值，這使得很少的方法能夠用於(yu) 腦脊液生物標記物的檢測。