小鼠胚胎冷凍保存的成功,極大地推動了低溫生物學的發展。胚胎冷凍保存現已成為(wei) 實驗動物保種的重要手段之一。實驗動物胚胎庫較活體(ti) 保種有著經濟又安全的優(you) 勢。而通過胚胎引種因為(wei) 快捷而廉價(jia) ,使得國內(nei) 外的胚胎運輸也變得日益廣泛。
氣相液氮運輸罐不同於(yu) 傳(chuan) 統的也相液氮罐,凍存的胚胎不直接接觸液氮。它的罐壁內(nei) 層有一層液氮層,液氮層吸附大量液氮,並向外排出液氮蒸汽來使罐內(nei) 溫度達到一188℃至一194℃。胚胎不接觸液氮,能降低胚胎之間的交叉感染。同時操作時不會(hui) 被液氮凍傷(shang) ,增加了安全性。
本次實驗中采用C57BL/6、B6D2、DBA/2、B10A4個(ge) 小鼠品係,是因為(wei) 其中既有近交係、同類係,也有雜交F1代。4個(ge) 品係的冷凍胚胎在氣象液氮運輸罐存放14天的複蘇率與(yu) 保存在氣相液氮罐的胚胎複蘇率均無差異;C57BL/6、B6D2、DB舭這3個(ge) 品係的出生率也無差異。結果中B10A小鼠的出生率的差異顯著可能時因為(wei) 本次實驗的時間跨度較大。
從(cong) 3月份一直持續到5月份,3月份放置氣相液氮運輸罐的室溫為(wei) ll℃,5月份為(wei) 18℃。環境溫度可能會(hui) 使氣相液氮罐內(nei) 的液氮蒸汽消耗過快,罐體(ti) 內(nei) 溫度便會(hui) 上升,而且環境溫度還會(hui) 在胚胎的轉移過程中產(chan) 生影響。
所以在盡量使放置氣相液氮運輸罐的環境保持比較低的溫度,本實驗胚胎在氣相液氮罐存放時間zui長為(wei) 14 d,因為(wei) 本次實驗考慮到國際運輸所需時間較長,所以胚胎每次存放時間都使用了氣相液氮運輸罐保存時間的上限。另外胚胎每次存放的數量較少,因此胚胎都在罐體(ti) 的底部,是整個(ge) 罐體(ti) 溫度zui低的地方。
考慮到實際運用中的運輸時間會(hui) 有長短以及運輸胚胎時數量較多時,一根冷凍管夾可能會(hui) 放上4個(ge) 冷凍管,所以胚胎就不一定都位於(yu) 罐體(ti) 的底部。有關(guan) 胚胎在氣相液氮運輸罐不同保存時間以及不同存放高度的保存結果,有待進一步研究。